分子熒光分光光度計的工作原理是具有限制性條件，分光光度計的工作原理是物質對光的選擇吸收和瑯伯-比爾定律。
光譜數據顯示可移動光標至屏幕中光譜位置，相應的數據將顯示，峰值谷值自動查找掃描結束后，可自動查找峰值和谷值，并且將數據結果顯示在列表中，結果也相應在圖譜中顯示。縮放圖譜查看圖譜的坐標X和Y可通過[設定]中來修改。導數光譜可對給定圖譜計算并顯示一階到四階導數圖譜。在吸光度模式下，導數光譜是一種極為有效的方法。
分子熒光分光光度計特點功能
*的雙光路、雙光束光學系統，儀器分辨率更高，穩定性、可靠性更強，分析更加準確。采用320*240位點陣式高亮6”液晶顯示器，顯示清晰，信息完備。強大的數據處理功能，主機可以獨立完成光度測量、定量測量、光譜掃描、動力學、DNA/蛋白質測試，多波長測試及數據打印等。整體光路獨立固定在16mm厚的鋁制無變形基座上，底板的變形和外界的震動對光學系統不產生任何影響，從而大大提高了儀器的穩定性和可靠性。一起光譜帶寬0.1/0.2/0.5/1.0/2.0/4.0六檔。采用*檢測器、氘燈、鎢燈等關鍵元器件，確保儀器經久耐用。*光柵的使用不僅大大的提高了紫外區的能量，同時使儀器具有超低的雜散光。
通過溶液的光必須是平行的；通過溶液的光必須是單色光；待測溶液必須是純凈的、均勻的且濃度不宜過高，這是瑯伯-比爾定律首要的三個前提條件。但是在實際的紫外可見分光光度計的制造和使用過程中這三個條件是不可能達到的。因為光是直線傳播的，在分光光度計制造過程中，燈源發出的光是發散的，經過聚焦鏡進行聚焦等直到經過溶液的整體過程中，光是不可能平行的。
燈源發出的光是復合光，經過狹縫，再經過光柵分光等步驟，因為受到狹縫和光柵本身的限制，光柵分光不可能達到純單色光。還有光度計的整體設計問題，分子熒光分光光度計不可能沒有其它的雜光存在。用戶的溶液也不可能是純凈的，也會含有一些雜質，這些對光度的吸收都會存在影響。
除以上三個方面的影響外，在實際的光度計應用過程中還會存在其他因素的影響，例如：經過比色皿的光是否垂直；比色皿寬度是否為10mm的標準值；測試波長是否準確；程序設計是否存在漏洞等等，都會直接影響到利用瑯伯-比爾定律計算出的結果。所以在日常的測試過程中，得出的結果和瑯伯-比爾定律有些偏差是很正常的，只是我們關注偏差多少的問題。
怎么區分紫外可見分光光度計與UV-4802雙光束紫外可見分光光度計
1.儀器采用320*240點陣液晶顯示器，直接顯示圖譜，屏幕界面簡單、方便使用；
2.設計*的光學系統、1200條/mm高性能全息光柵和進口接收器確保儀器有優良的性能指標；廣泛應用于食品、藥品、電力、生物研究、教學科研、化學化工、質量監督、水質環保和商檢等各大領域。V-1300型可見分光光度計，波長范圍：320nm-1100nm，能滿足不同物質的測試。
先說分子熒光分光光度計，雙光束儀器有單波長雙光束和雙波長雙光束兩類；雙光束優點：首先，消除了光源不穩定和放大器增益變化以及光學和電子學元器件對兩條光路不平衡的影響；然后是比例雙光束，它與雙束光的不同是：光按比例分開，一般樣品光束強度大于參比光束，其目的是提高信噪比；在雙光束類型儀器中，兩束光的強度各為50％，均通過樣品室；一束光為樣品道用，另一束光為參比道用；以單波長雙光束儀器為例：從單色器射出的單色光被半透半反鏡或切光器分裂為兩束光，這就是UV-4802雙光束紫外可見分光光度計雙光束形成的過程；
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